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  在畜牧业健康监测与人类疾病动物模型研讨中，牛的免疫系统剖析至关重要。流式细胞术作为免疫表型剖析的中心东西，长期以来受限于牛特异性抗体荧光符号品种缺乏，难以实现多细胞群同步检测。近来，Bio-Rad推出根据StarBright™染料偶联抗体的11色免疫表型剖析计划，成功打破传统技能瓶颈，为牛免疫细胞研讨供给了高效解决计划。

  牛作为肉奶重要来历及结核病等人类疾病的形式动物，其免疫状况监测对工业健康和科研发展含义严重。传统流式剖析存在两大关键问题：

  抗体符号受限：牛特异性抗体可选择的荧光基团规划狭隘，导致检测panel规划小，单一样本难以获取全面免疫信息；

  现有计划单一：已宣布的牛优化多色免疫荧光panel（OMIP）仅为8色，且多聚集于T细胞或B细胞单一细胞类型，缺乏以满意杂乱免疫剖析需求。

  Bio-Rad结合丰厚的牛特异性抗体库与立异StarBright™染料技能，打造的11色免疫表型剖析panel展现出三大中心优势：

  该panel无需拆分试验，可同步辨认牛血中五大类首要免疫细胞及亚群，包含：

  B细胞亚群：B细胞（CD2-CD21+）及其naive与活化/回忆亚群；

  最小化溢漏与分散：经过5激光检测器的合理分配，调配Pacific Blue与StarBright系列染料的科学组合，大大下降信号搅扰；

  精准符号战略：将易发生分散的荧光基团别离用于不同细胞类型的符号，防止剖析时的辨认搅扰，保证细胞群区别的高分辨率；

  标准化流程保证：一切抗体均经过滴定优化，结合DAPI活死细胞染料扫除假阳性，保证数据可靠性。

  该计划无需特别染色缓冲液，仅运用含1%BSA的PBS就可以完结染色，既下降试验本钱，又能无缝融入现有试验流程。一起，panel规划遵从流式试验最佳实践，可作为根底结构，经过 TrailBlazer™符号试剂盒扩展更多检测靶点，满意个性化研讨需求。

  1.选用1日龄牛肝素化外周血，经红细胞裂解液处理后，用胎牛血清+10% DMSO冻存；

  2.37℃快速冻结后，以10%牛血清关闭5分钟，参加11色荧光偶联抗体室温孵育1小时；

  1.根底gates：先扫除死细胞（DAPI阴性）和双体细胞，圈定单个核细胞群

  2.细胞群断定：经过HLA ABC（牛BoLA同源分子）阳性挑选nucleated细胞，结合CD14区别单核细胞与淋巴细胞，再利用CD16、CD21、CD2等标志物别离辨认NK细胞、B细胞和T细胞。亚群细分：根据CD4、CD8区别T细胞亚群，经过CD62L表达断定细胞活化/回忆状况。

  Bio-Rad凭仗立异StarBright™染料技能与丰厚的牛特异性抗体资源，成功打破传统流式计划的局限性。该11色panel以全面的细胞掩盖、精准的信号检测、快捷的试验流程，为牛免疫系统研讨带来打破性发展。

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